帕維亞之戰，決定意大利戰爭結局的一次決定性會戰，發生時間是在1525年4月26日，參戰方是神聖羅馬帝國，法國，傷亡情況神聖羅馬帝國傷亡不到1000 法軍傷亡8000人，最終結果神聖羅馬帝國獲勝。
在此戰中，法國王室統帥波旁公爵夏爾三世·德·波旁因與法國國王的家族矛盾，憤而出賣國家，投奔查理五世，率領部分法國軍隊及一支哈布斯堡王朝軍隊在帕維亞城下襲擊由弗朗索瓦一世親自帶領的法國軍隊，法軍被各個擊破後大敗，弗朗索瓦被夏爾三世俘虜後轉交給查理五世，查理五世將他囚禁在馬德里，而最終兩國簽署馬德里協議，迫使弗朗索瓦一世爲了取得自由，不惜割讓勃艮地(給查理)、布列塔尼(給英王亨利八世)等領土。但弗朗索瓦一世一回到法國，就宣佈撕毀條約，不但拒絕割讓土地給查理和英國，還繼續出兵和查理作戰。
西班牙在帕維亞中大敗法國，使很多意大利及德意志人感到意外，令人擔心查理五世將會繼續擴張勢力。很快地，教宗克萊孟七世倒戈支持法國及意大利一些重要城邦，以上帝的名義宣佈，弗朗索瓦一世與查理五世所簽訂的割地條約無效;克萊孟七世還主動參與針對哈布斯堡帝國的科涅克同盟戰爭(英語：War of the League of Cognac)(1526-1529年)。
查理五世因此勃然大怒，加上查理漸漸厭倦克萊孟七世教宗干預他認爲與宗教毫無關係的事務，波旁公爵夏爾三世率領軍隊攻打羅馬，在1527年攻陷羅馬，使教宗蒙羞。結果，以後克萊孟七世與繼任的教宗在與世俗勢力交往時，都顯得加倍謹慎，不敢違背西班牙國王。1529年法國在蘭德里亞諾戰役被西班牙再次擊敗，正式放棄米蘭予西班牙;教宗更與查理簽署巴塞隆那和約，結束科涅克同盟戰爭(英語：War of the League of Cognac)並建立更和諧關係。西班牙正式成爲天主教的保護者，而查理被教宗加冕爲意大利國王(倫巴第)。
