光緒三十四年11月，在光緒死後的第二天，曾經權勢滔天的慈禧太后也去世了，二人的死期，僅隔一天。
慈禧是晚清實際上的統治者，雖名義上是太后，可是同治，光緒兩任皇帝，都被慈禧掌控，並沒有真正執政的權力。當初清廷勢微，光緒皇帝雄心勃勃，想要變法圖強，慈禧表面上不加以干涉，然而當變法損害到以慈禧太后爲首的守舊派的利益時，慈禧快刀斬亂麻，發動戊戌政變，囚禁了光緒帝，追殺維新黨人。皇帝和太后之間的關係，就此勢如水火。
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但是因爲缺乏權力，光緒帝名爲皇帝，卻始終活在慈禧的掌控中。在慈禧掌權的時候，他難以翻出什麼浪花。或許那時候光緒帝唯一的期望就是，等到慈禧太后去世以後，他就能夠重新執政。
但是所有人都沒有想到的是，年輕的皇帝，竟然會死在了慈禧太后之前，並且兩人之間的死期，僅隔一天。這其中的巧合，一直引發了無數人的猜想。
大內太醫屈桂庭在《診治光緒帝祕記》中記載到：光緒的病情是突然轉危的，並且之前沒有明顯的預兆和異樣。光緒死前三天“在牀上亂滾”，“向我大叫肚子痛得了不得”，且“面黑，舌焦黃”，“此係與前病絕少關係”。其實這段記載雖然沒有明說，但已經寫的很清楚了，光緒帝臨死前的症狀，是明顯的中毒症狀。
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很多人都覺得，毒死光緒帝，是慈禧太后在這世上乾的最後一件壞事，那麼，她爲什麼這麼做呢?
據說，在光緒三十四年(1908年)十月，光緒生病臥牀。這時慈禧也生病了。光緒在日記中寫道：“我病得很重，但是我心覺得老佛爺(指慈禧)一定會死在我之前。如果這樣，我要下令斬殺袁世凱和李蓮英。”不料這段日記被李蓮英獲悉，他立即報告了慈禧，說：“皇上想死在老佛爺之後呢!”慈禧聽了，恨恨地說：“我不能死在他之前!”
光緒想要掌權，慈禧也很明白他這份心思，而自己控制光緒多年，加上政見的不和，兩人之間的關係，已經是降至冰點，慈禧很清楚，一旦自己死了，光緒又掌權了，恐怕自己的身後榮耀，也就都沒有了。慈禧高高在上了一生，自然不能容忍，死後的任何不敬。綜合光緒死前的中毒症狀，加上兩人相隔一天的死期，很多人認爲，光緒帝不是自然死亡，而是被慈禧毒死的。
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2008年，“清光緒帝死因”專題研究課題組發佈研究報告，稱專家們歷時5年，由光緒帝頭髮中的砷含量入手，利用“中子活化”、“X射線熒光分析”、“原子熒光光度”等一系列現代專業技術手段，通過開展對比、模擬實驗、雙向圖例等工作，對清西陵文物管理處提供的光緒帝遺體的頭髮、遺骨、衣服以及墓內外環境樣品進行了反覆的檢測、研究和縝密的分析後，最終確證：光緒帝突然“駕崩”系急性胃腸性砒霜中毒所致。
這個結論，證實了光緒不是突如其來的死亡，確實是屬於他殺。
這個結論一出來，關於光緒的死因，也逐漸清晰。能夠對皇帝下毒的，必然是他身邊的人;而能夠指使光緒身邊人下毒的那個人，答案也呼之欲出，恐怕正是當時一手遮天的老佛爺慈禧。這個推斷一出來，很多人都氣憤不已，慈禧控制了光緒一生，竟在死前都不願意放過他。
